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羽衣甘蓝类受体激酶FERONIA基因克隆、表达及与相互作用蛋白分析
植物研究
2024, 44 (2):
298-306.
DOI: 10.7525/j.issn.1673-5102.2024.02.015
FERONIA（FER）受体激酶在有性生殖中的花粉与柱头信号识别中发挥重要作用，为分析类受体激酶FERONIA（FER）在羽衣甘蓝（Brassica oleracea var. acephala）授粉中的作用，以羽衣甘蓝自交不亲和系（S13-bS13-b ）为研究材料，采用RT-PCR从柱头中克隆得到BoFER基因，获得的BoFER cDNA序列，全长2 682 bp编码893个氨基酸，其含有高度保守激酶结构域和Ser/Thr激酶结合位点。利用qRT-PCR技术对BoFER在授粉过程中的表达水平进行分析，结果发现BoFER在不亲和授粉过程其表达量逐渐升高，而在亲和授粉过程中其表达量逐渐降低。利用酵母双杂交分析BoFER与已知的自交不亲和相关蛋白的相互作用，结果显示BoFER与S位点受体激酶BoSRK13-b的激酶域存在相互作用。  View image in article
图1
羽衣甘蓝BoFER的RT-PCR扩增结果
正文中引用本图/表的段落
以羽衣甘蓝S13-bS13-b 株系柱头cDNA为模板，通过RT-PCR克隆得到BoFER（见图1），通过测序结果发现BoFER大小为2 682 bp，编码893个氨基酸（见图2）。BoFER蛋白分子质量大小为97.25 kDa，等电点为5.89。通过SMART数据库分析，BoFER蛋白结构域主要由信号肽区域、Malectin-like区域、跨膜螺旋区域、Ser/Thr激酶结构域及低成分复杂区组成（见图3）。从NCBI数据库中检索出油菜（Brassica napus）、白菜（B. rapa）、拟南芥的FER氨基酸序列，与BoFER进行序列相似度分析发现，与油菜BnFER序列相似度达98.5%，与白菜BrFER序列相似度达96.5%，与拟南芥AtFER序列相似度达81.3%，且BoFER激酶结构域及Ser/Thr激酶结合位点高度保守（见图4）。
本文的其它图/表
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