摘要： 【目的】为科学治理废弃矿山边坡，探究土壤细菌永久绿化法在生态修复中的应用与推广，对分离筛选出的高效溶蚀菌株进行发酵条件优化及应用效果分析。【方法】从南京幕府山风化岩壁土壤中分离出多种溶蚀微生物，并从中挑选出1种表现突出的溶蚀细菌菌株NL-11[经16S rRNA鉴定为苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）]进行发酵条件优化，利用盆栽试验观测其应用效果。首先利用单因素和Plackett Burman（PB）试验筛选出影响菌株生长的3个主要因素，即装液量、培养温度和时间；在此基础上使用最陡爬坡路径逼近最大响应区域；再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法进行回归分析；最后通过比较预测值与实测值验证模型可靠性。利用优化结果制备菌液，将制备好的菌液调节为低（10 cfu/mL）、中（1×10～5 cfu/mL）和高（1×10～9 cfu/mL）3种菌液浓度拌入基质（分别为T1、T2、T3处理）进行盆栽试验，设置不加菌液的处理为空白对照（CK）,研究不同浓度菌液对矿物风化、植物和根系生长的促进作用。【结果】模型准确可靠，菌株NL-11的最佳发酵培养条件为：装液量19.51 mL,接种量2%（体积分数）,初始pH 7.0,培养温度30.30℃,培养时间22.07 h,在此优化条件下发酵液中活菌数达到1.47×10¹⁰ cfu/mL,是未优化前的2.03倍。盆栽试验结果表明，菌株NL-11能够促进矿物风化，以高浓度菌液效果最显著；NL-11能够促进矿质养分溶解，以高浓度菌液效果最显著；NL-11能够促进植物及根系生长，以中浓度效果最显著。【结论】通过优化试验显著提高了菌株NL-11的发酵活菌产量，为菌株在边坡治理中的应用提供技术支持，综合评价菌株的应用效果并考虑生产成本等因素，喷播实践中的合适菌液浓度为1×10～5 cfu/mL。

关键词: 生态修复, 苏云金芽孢杆菌, 发酵条件优化, Box-Behnken设计

中图分类号: 

• S732

• TQ920.6